当前位置: 首页 > 期刊 > 《中国药房》 > 202022
编号:13790575
尼可地尔对肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移能力和Hippo/YAP信号通路的影响(3)
http://www.100md.com 2020年11月15日 《中国药房》 202022
     2.3 细胞增殖能力检测

    采用CCK-8法检测。取“2.2”项下分组、处理、继续培养48 h的细胞,弃去培养基,用PBS清洗后,每孔加入CCK-8试剂10 μL,于37 ℃、5%CO2培养箱中继续孵育40 min,使用酶标仪检测450 nm波长处的光密度(OD值),OD值与增殖能力成正相关。试验重复3次。

    2.4 细胞迁移能力检测

    采用Transwell法检测。取“2.2”项下分组、处理、继续培养48 h的细胞,经消化后,用无血清的DMEM培养基重悬并稀释成1×105个/mL的细胞悬液。于Transwell小室上层加入细胞悬液200 μL,下层中加入含20%FBS的DMEM培养基500 μL,于37 ℃、5%CO2的培养箱中培养24 h。取出小室,用PBS洗去培养基,结晶紫染色10 min,用PBS清洗3次,用棉签将上层接种侧的细胞擦除干净,于显微镜下随机选取5个视野,进行细胞计数。试验重复3次。

    2.5 细胞中CTGF和AREG mRNA表达的检测

    采用qRT-PCR法检测 ......
上一页1 2 3 4下一页

您现在查看是摘要页,全文长 4033 字符