当归多糖抑制氧化损伤延缓造血干细胞衰老(药理)

当归多糖抑制氧化损伤延缓造血干细胞衰老(2)

http://www.100md.com 2013年2月1日《中国中药杂志》 2013年第3期

     1.4.3 混合集落培养收集各组1×104 个HSCs，离心弃上清，加甲基纤维素半固体培养基1 mL混匀，接种于96孔板，在37 ℃，5% CO₂及饱和湿度的培养箱中孵育10～12 d，依接种HSCs数量与形成混合集落形成单位(colony forming unity-mixture， CFU-Mix)的数量评价HSCs的多向分化能力。

    1.5 免疫荧光和流式细胞术检测细胞产生的ROS含量

    收集各组1×10⁶ 个HSCs，重悬细胞，装载2′，7′-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)探针，37 ℃孵育20 min，无血清培养基洗涤3 次，分别用于激光共聚焦显微镜直接观察及流式细胞仪525 nm处检测荧光，ROS含量以二氯荧光黄(DCF)荧光强度表示。

    1.6 细胞T-AOC检测

    收集各组1×10⁶ 个HSCs，加PBS 1 mL制备成细胞悬液 ......

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