PCR增强剂对药材DNA分子鉴定的影响(3)
图2 脂加氧酶基因位点特异性PCR结果Fig.2 Allele specific PCR of lipoxygenase
3.6 增强剂无效样品的比较分析 为了进一步分析PCR增强剂对中药材种类的选择性,本文对使用的180个样品进行了初步的分类,并对使用增强剂无效的样品进行了归类分析,见表5。结果表明,对ITS2, rbc L及 psbA-trnH 片段来说,根及根茎类、果实种子类、茎木类使用PCR增强剂的效果不明显,而叶及全草类、花类、动物药及其他类则相对容易获得扩增产物。这可能与药用部位相关,根及根茎或茎木类中药多是从土壤中挖出,更容易污染腐殖质等强PCR抑制剂,使PCR扩增效率下降。同时,一般根类或果实种子类会经过蜜制、炒制等更多的炮制加工,而花类、全草类一般只需净制后杀青或晒干,引入PCR抑制剂的程度较低,使用PCR增强剂效果更明显。
表5 扩增不成功样品的归类分析
Table 5 classify of failed amplification sample by medicinal parts
4 讨论
中药材来源于天然药物 ......
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