2 方法

    2.1 人工混合基质配制和种子播种 收集枯枝落叶，自然风干后人工粉碎，松树皮先用水浸泡1月左右。将准备好的树叶、松树皮和椰糠按1∶1∶1加适量水均匀混合，作为2种石斛种子共生萌发的培养基质。滤除基质中多余水分，保持其水分达到饱和状态。将配好的混合基质分别装入144个长、宽、高分别为12，7 ，4.5 cm的透明塑料培养盒中，每盒装入约1/3容积的基质，基质上放置2条长宽为10，1.5 cm，孔径为45 μm的尼龙网布，用于播种。这样既不影响基质中的真菌菌丝穿过尼龙网布侵染石斛种子，又可使种子不掉落于基质中，便于计数和统计萌发率。将装好基质的培养盒盖上盒盖，在高压灭菌锅中于102.9 kPa，121 ℃条件下灭菌20 min，以消除基质中的杂菌，灭菌后的培养盒置于超净工作台于室温下自然冷却待用。

    2种石斛的种子用1%有效氯离子浓度的次氯酸钠溶液浸泡15 min后，在超净工作台上分别取适量种子和质量浓度为1 g·L^-1的无菌琼脂溶液在锥形瓶中充分摇匀，制成种子悬浮液。兜唇石斛和齿瓣石斛1 mL种子悬浮液平均种子数分别为42，125.6 粒。用移液枪吸取1 mL种子悬浮液 ......