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编号:12645396
草珊瑚与金粟兰叶片双位点特异性PCR鉴别方法研究(1)
http://www.100md.com 2014年9月1日 中国中药杂志 2014年第17期
     [摘要] 筛选获得草珊瑚与金粟兰鉴别的特异位点并建立双位点特异性PCR方法,用于鉴别草珊瑚与金粟兰叶片以及两者的混杂品。采集不同产地的草珊瑚18份、金粟兰6份,所有样品提取总DNA,并对草珊瑚与金粟兰干燥叶片进行DNA提取。通过对其ITS片段进行扩增、测序,并搜索GenBank 数据库中收录的草珊瑚与金粟兰的ITS序列,进行同源比对后根据其变异位点设计特异性鉴别引物,构建多重PCR体系,并优化PCR条件,对草珊瑚与金粟兰叶片进行快速分子鉴定。构建了多重PCR鉴别体系,只经一个PCR反应,能扩增出草珊瑚580 bp的特异性鉴别条带及金粟兰470 bp的特异性片段,可快速鉴别草珊瑚与金粟兰叶片,并可判断相互是否混杂。使用双位点特异性PCR技术可以有效快速鉴别草珊瑚与金粟兰叶片,并可判断相互是否混杂。

    [关键词] 草珊瑚; 金粟兰; 叶片;特异性PCR;分子鉴定

    草珊瑚形态变异较大且与近缘植物形态极其相似,加之名称的交叉混杂以及资源的不足造成了误采、误用,出现了金粟兰、鱼子兰等与草珊瑚功效不尽相同的非药典收载的混淆品,特别是金粟兰,叶片最为相似 ......
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