碱裂解法快速提取中药炒制品DNA的研究(2)
3 结果与分析3.1 炒制品DNA碱裂解缓冲液候选配方 为探索提取槐米清炒品DNA的碱裂解缓冲液最适配方,本文分别采用0.1,0.25,0.5,0.75,1.0 mol·L-1NaOH配制碱裂解液。由于碱裂解法提取的DNA模板不能通过凝胶电泳检测,故本文采用通用引物ITS2进行PCR扩增,以检测DNA提取效果。PCR扩增结果表明,以0.5 mol·L-1NaOH配制的碱裂解液提取DNA进行PCR扩增,其PCR产物浓度最大(图1)。确定以0.5 mol·L-1 NaOH,1% PVP40,1% TritonX-100配制碱裂解缓冲液为候选配方,与蒋超等[10]报道了基于碱裂解法的中药材快速DNA提取方法中配方一致。
3.2 炒制程度对DNA提取的影响 为进一步研究炒制品碱裂解法对清炒程度(炒制温度、炒制时间)的适用范围,本文选择14个不同炒制温度(120~250 ℃) ......
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