云南特色中药臭灵丹体外抗甲型H1N1流感病毒的实验研究(3)
1.3.2 臭灵丹萃取物对甲型H1N1流感病毒的增殖抑制作用 将病毒稀释到终浓度为1×10-2，先加入细胞作用24 h后弃掉病毒液，加入中药溶液。药物终浓度为5，20，50，100 mg·L-1。对照的设置参照前面的实验步骤。培养到24，48，72，96 h分别收样，观察细胞病变情况，同时通过血凝效价的测定来判断不同萃取物对病毒的增殖抑制作用。
1.3.3 RT-PCR鉴定甲型H1N1流感病毒RNA 用6孔板重复上述中和实验和抗增殖实验，每个药物设3个复孔，收集各编号的培养液，4 000 r·min-1离心10 min，收集上清，按照试剂盒所写步骤来提取总RNA。通过比对Gene bank 里的多株A型甲流病毒株的保守序列，以(A/Swine/Iowa/30 (H1N1))株为准，gene bank的登录号为AF250364.2 。通过primer 5.0来设计引物，正向引物5′-TTCTAACCGAGGTCGAAACG-3′，反向引物5′-ACAAAGCGTCTACGCTGCAG-3′，目的片段大小为235 bp ......
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1.3.3 RT-PCR鉴定甲型H1N1流感病毒RNA 用6孔板重复上述中和实验和抗增殖实验，每个药物设3个复孔，收集各编号的培养液，4 000 r·min-1离心10 min，收集上清，按照试剂盒所写步骤来提取总RNA。通过比对Gene bank 里的多株A型甲流病毒株的保守序列，以(A/Swine/Iowa/30 (H1N1))株为准，gene bank的登录号为AF250364.2 。通过primer 5.0来设计引物，正向引物5′-TTCTAACCGAGGTCGAAACG-3′，反向引物5′-ACAAAGCGTCTACGCTGCAG-3′，目的片段大小为235 bp ......
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