合欢皮总皂苷抗肿瘤作用靶点鉴定与分子机制解析(3)
3 结果与分析3.1 TSAJ对人肝癌细胞系HepG2的生长抑制作用 MTT法检测了TSAJ对HepG2细胞的生长抑制作用,发现TSAJ在0.78~12.5 mg·L-1对HepG2细胞的生长抑制作用具有浓度依赖性,见图1,IC50为7.93 mg·L-1。
3.2 TSAJ显著增加HepG2细胞凋亡率 为了进一步验证TSAJ通过诱导细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,将不同浓度TSAJ给药HepG2细胞,作用24 h后,通过Hoechst 33258法染色检测细胞凋亡。结果显示,TSAJ处理细胞后,细胞核随给药浓度增大越来越小,出现染色质固缩的现象;核发出的蓝色荧光逐渐增强,出现如黄色箭头所示的核凋亡现象,见图2。统计发现,TSAJ能显著增加HepG2细胞的凋亡率。
3.3 TSAJ作用靶点群的富集与鉴定 利用环氧基琼脂糖凝胶固相微球作为载体,构建了表面修饰了TSAJ的固相亲和微球。TSAJ修饰后,固相微球颜色明显加深 ......
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