不同方法分离的大鼠骨髓间充质干细胞增殖活性和成脂分化能力的比较(2)
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入指数增长期,增殖速度低于前一组:至第9天,细胞增殖明显减慢进入下台期(见图3)
2.4大鼠MSCs定向诱导脂肪细胞:两种方法所分离的细胞加入诱导培养液后,第3天在相差显微镜下可观察到细胞胞质内有高折光性的小脂滴出现主要集中于细胞核周围,随着诱导时间的延长细胞内脂滴逐渐增多,胞内小脂滴逐渐聚集成大脂滴,细胞体积逐渐增大由原来的长梭形变为圆形或多角形,脂肪细胞中含大小不等的脂肪滴,脂滴被染成橙红色证实诱导成脂肪细胞,而未诱导的对照组细胞则表现为阴性(见图4、5)。每组随机选取5枚盖玻片,对两种方法所获骨髓间充质干细胞做油红O染色后的脂肪细胞计数比较,结果密度梯度离心法和贴壁法的均值分别为(62.73±2.92)和(59.63±4.53),经t检验显示两组细胞之间无显著差异(P=1.39>>0.05)。
2.5油红O染色定量试验:对两种方法所获骨髓间充质干细胞做油红O染色光密度值测定比较,结果密度梯度离心法和贴壁法的均值分别为(0.28±0.14)和(1.01±0.99),经t检验显示两组之间无显著差异(P=0.191>0.05)。
3 讨论
1986年Friedenstein等首次报道 ......
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