3.2缓冲液、培养基

    配制缓冲液与培养基时要严格按照说明书的要求配制，配制缓冲液的试剂应为分析纯的化学试剂，培养基来源应相对固定，严格按照要求的pH值进行调节，由于pH值的不同可能会出现卵圆形抑菌圈，培养基酸碱度会显著的提升或抑制抗生素的杀菌作用，碱性条件下，抗生素甚至失去杀菌作用[13-14]。姚永青等[9]研究发现由于国内培养基质量参差不齐，应对培养基质量进行严格控制，在用管碟法做抗生素效价测定时，应选择最适传代培养基与检定培养基作为试验的系统适用性条件。

    4试验菌的制备

    试验菌株特性发生变异，也会严重影响结果的准确性，ChP 2015明确规定试验菌应使用标准菌株，并规定了菌株编号和菌悬液的制备方法，保证制备菌悬液的菌株在3～5代，并采用适宜的菌种保藏技术保存菌悬液及菌种培养物，保证试验菌株的生物学特征不变[15]。试验菌株的菌龄不等，会导致抑菌圈的扩散系数不均匀，进而导致抑菌圈的边缘不清晰，这也是影响试验结果的重要因素之一[14]。

    菌液的复苏也是试验成败的关键因素，要掌握好复苏时间，过短菌种没有苏醒，过长菌种又进入了休眠状态[10] ......